有关羟自由基试剂盒的几个问题

发布时间：2014/2/8 9:23:05　浏览次数：3278　[字号：大 中 小]　 [关闭此页　打印此页]

近期对其中相关指标进行了探索，对其中有些问题心存疑惑，考虑到近期试验的需要，望尽快解答。

有关羟自由基试剂盒的几个问题：

第一，多次试验发现实验数据（包括标准管、对照管等）的平行性不是很好，不同时间测定相应结果有时相差较大，请问这点如何解决？

第二，考虑到羟自由基本身的一些原因，请问测定中主要需注意什么问题啊？比如测定时间，测定条件等。

第三，在探索最佳浓度时，发现同样存在平行性较差的情况，而且，再次探索最佳浓度时，发现最佳浓度发生了变化。请问是不是此后每次试验前必须先进行最佳浓度的探索，而后才能进行正式样品的大批量测定？

有关GR（谷胱苷肽还原酶）的测定：

近期试验发现，2分30秒测定的吸光度与30秒测定的吸光度差值较小，一般在0.005左右，考虑到染毒试验，请问染毒后差值是否会有显著变化？也就是GR活性是否会有较显著变化？

回复：

羟自由基试剂盒操作确实要求较高，由于反应时间较短，对样本加入量的准确性，控制反应的时间，要求都较高！同时样本的稳定性也不好，所以制备好匀浆后（破碎细胞后），2-8℃冷藏尽快完成检测（不可过夜）！

批量检测之前需要做预实验确定最佳样本浓度！查我们检测记录，出现平行较差的情况，一般有3点：1、样本及试剂二加入量有误差；2、反应时间控制有偏差；3、样本存放时间偏长，匀浆不均一，导致加样有偏差！

GR测定，如果2次OD变化值太小，也就是样本中的GR表达较低，如需改善，一般有2点：1、加大样本浓度或取样量；2、延长反应时间！

心肌灌注的冠脉流出液中的LDH和CK的测定

细胞膜上和肌浆网上的钙-ATPase测定的问题？